【チャレンジテスト（保存効力試験】

チャレンジテスト（保存効力試験）

日本薬局方（JP）が規定している保存効力試験は、化粧品などの試料に含まれる防腐剤の効力を、試験菌液を一定量（菌数）を寒天培地に接種して、試料を培養しながら、長期間（例えば、７日間）に渡り、微生物によるコロニーの出現を観察して、コロニーの増減を確認し、保存効力を確認する作業になります。
これは、人手による目視検査で実施するには、労力の要するたいへんな作業であるためか、チャレンジテストと呼ばれています。

AutoScanner を採用すれば、

(Compac 25でもできます．）

保存と 生菌数計数 の

全ての工程が 全自動 になります。

※参考資料　日本防菌防黴学会第52回年次大会　

シンポジウム　「防腐力試験の迅速化の提案」

防腐力設定

１.チャレンジテストの前に、防腐力を次の菌を使用して設定します。
　　・大腸菌：　　　　Escherichia coli 　（ NBRC 3972）　通性嫌気性菌　グラム陰性菌
　　・黄色ブドウ球菌：Staphylococcus aureus （NBRC 13276）通性嫌気性菌　グラム陽性菌
　　・カンジダ菌：　　Candida albicans　　　 (NBRC 1594) 　　通性嫌気性菌　真菌
　　・アクネ菌：　　　Cutibacterium acne　　通性嫌気性菌　グラム陽性菌
　　　　※この菌は、増殖に対する影響を確認したいときに実施します。

２．検査キット（SensiMedia）を用いて、迅速に防腐力を確認します。

SM017　( SCDLP )

(1) センシメディア SM017 (SCDLP) のキャップを開けて、試料（化粧品）を 1ml（1g）を混合します。
　これを5本用意します。
(2) 各試験菌の希釈系列の菌液を10の６乗程度から5段階調製します。

(3) 試料検体への試験菌液の接種

　・試料入り検体：５本の検体入り検査キットに、それぞれの希釈系列の菌液1mlずつ添加します。
　・コントロール： 5本のセンシメディアに、それぞれの希釈系列の菌液1mlずつ添加します。
(4) 5本の検体とコントロール5本を所定温度(20～25℃)で、48時間培養します。
(5)３菌種（細菌、真菌）で、48時間で防腐力が確認できます。

基本的に防腐剤は殺菌剤ということですので、菌の細胞壁の造り（グラム陰性か、グラム陽性か、）が大きく関係してきます。防腐剤の適切な濃度設定は、比較的容易にできます。防腐力の "見えるか" ができています。

保存効力試験（チャレンジテスト）

試験手順
　　＊日本薬局方（JP）に基づいた方法
　(1) 試験菌液の調製
　　　試験菌を培養して食塩水などに懸濁し、試験菌液を調製します。
　(2) 検体への試験菌液の接種
　　　検体に試験菌液を一定量（菌数）接種します。
　(3) 検体をAutoScannerに装填します。
　　　（保存と生菌数計数が自動的に実施されます。）
　　　・保存（遮光下、22.5±2.5℃で保存します（例：7日）。）
　　　・生菌数計数
　評価
　　ヒストグラムと画像で試験菌の減少・増加度合いを確認し、
　　保存効力を評価します。